流动相单分子免疫检测系统的设计
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摘要: 为实现肿瘤标志物的早期诊断,本文设计了一种适用于流动相样本的单分子免疫检测系统,并对其光学荧光成像平台及图像检测计数算法进行了研究。首先,为满足低浓度、高通量样本的即时检测需求,提出了一种基于流动相的单分子免疫检测方法。其次,结合微流控芯片的规格要求,设计了一套光学荧光成像检测平台,通过滤光和分光元件的合理配置,利用多模块集成实现荧光样本的高分辨率成像。最后,在离焦粒子的图像检测计数算法的基础上,优化了特征匹配方法,以高效处理非焦面荧光粒子信号。实验结果表明,本系统在单分子免疫标志物样本检测中的下限可达到0.001 pg/mL,在0.001~1 pg/mL的理论检测范围内,精度小于10% CVs,可在一小时内完成最多十份样本的检测。本系统满足了单分子免疫检测的稳定性、高灵敏度和高通量检测需求,在癌症早期筛查领域具有重要的应用前景。Abstract: 为实现肿瘤标志物的早期诊断,本文设计了一种适用于流动相样本的单分子免疫检测系统,并对其光学荧光成像平台及图像检测计数算法进行了研究。首先,为满足低浓度、高通量样本的即时检测需求,提出了一种基于流动相的单分子免疫检测方法。其次,结合微流控芯片的规格要求,设计了一套光学荧光成像检测平台,通过滤光和分光元件的合理配置,利用多模块集成实现荧光样本的高分辨率成像。最后,在离焦粒子的图像检测计数算法的基础上,优化了特征匹配方法,以高效处理非焦面荧光粒子信号。实验结果表明,本系统在单分子免疫标志物样本检测中的下限可达到0.001 pg/mL,在0.001~1 pg/mL的理论检测范围内,精度小于10% CVs,可在一小时内完成最多十份样本的检测。本系统满足了单分子免疫检测的稳定性、高灵敏度和高通量检测需求,在癌症早期筛查领域具有重要的应用前景。
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